常用6种灭菌方法有哪些:实操对照

常用6种灭菌方法有哪些,分别是湿热灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌、环氧乙烷灭菌、过滤除菌、辐射灭菌;湿热灭菌依靠高温水汽杀灭微生物芽孢,适合耐湿耐热耗材,121℃、0.1MPa维持20分钟是实验室常规参数,干热灭菌依靠高温空气氧化菌体,多用于玻璃器皿与金属器具,紫外线灭菌破坏核酸结构,仅能对无遮挡平面起效,穿透能力偏弱,环氧乙烷灭菌属于低温气体灭菌,适配不耐高温的高分子器械,灭菌周期较长,过滤除菌依靠滤膜截留菌体,不杀灭微生物,适合热敏液体,辐射灭菌利用电离射线破坏生物大分子,多用于一次性医用耗材,过滤除菌无法去除病毒小分子颗粒,不能用于需要彻底灭活病毒的制剂灭菌场景。

常用6种灭菌方法基础操作

湿热灭菌,你把物品整齐放入高压蒸汽灭菌器,包装留出透气缝隙,排尽腔内冷空气后升压升温,到达设定温度后开始计时,结束后缓慢泄压,避免液体喷溅,橡胶类物品反复高压后老化速度会加快。干热灭菌,将洗净干燥的玻璃、金属器具放入干热箱,升温至160℃持续2小时,物品不能堆叠过密,含有水分、油脂的样品不适合放入,容易出现碳化。

紫外线灭菌,你清理干净照射表面,移除遮挡物,开启紫外灯,距离控制在1米以内,照射时长30分钟以上,灯管表面灰尘会大幅降低灭菌效果,每周擦拭一次灯管,人体皮肤、眼睛不能长时间暴露在紫外照射环境下。环氧乙烷灭菌,把封装好的器械放入灭菌柜,控制温湿度和气体浓度,完成灭菌后必须执行解析流程,降低残留气体,解析时间不足会带来残留刺激风险。

过滤除菌,选用孔径0.22μm的滤器,在无菌环境下完成液体推送,依靠物理截留移除细菌和真菌,小分子病毒、支原体可以穿过滤膜,不能实现全微生物灭活,滤膜堵塞后要及时更换,不要强行加压。辐射灭菌,一般采用钴60或者电子束辐照,灭菌过程不升温,包装可以在灭菌前密封完成,适合大批量一次性用品,部分塑料材料长期辐照后力学性能会下降。

常用6种灭菌方法对比

灭菌方式核心原理典型适用物主要局限
湿热灭菌高温水汽使蛋白变性培养基、纱布、金属器械不耐湿、不耐热物品不可用
干热灭菌高温氧化破坏菌体组分玻璃试管、镊子、粉末灭菌耗时久,怕烤焦样品禁用
紫外线灭菌损伤微生物核酸洁净台、室内空气、台面无穿透性,阴影区域无效
环氧乙烷灭菌烷基化破坏核酸蛋白硅胶导管、电子类精密器械需要解析,周期长
过滤除菌滤膜物理截留微生物血清、抗生素溶液无法截留小型病毒
辐射灭菌电离射线破坏生物大分子一次性注射器、敷料部分高分子材料易老化

选灭菌方式,优先看样品三个属性:耐热性、耐湿性、是否允许残留。能耐高温耐潮湿的样品优先湿热灭菌,它的灭菌可靠性较为稳定,操作门槛低,是微生物实验室使用频次更高的方案。

环氧乙烷残留检测可以参照GB15982-2012《医院消毒卫生标准》中的限值要求,器械使用前环氧乙烷残留量不能超过规定阈值,避免接触后产生不适反应。

过滤除菌不算杀灭型灭菌。

直接接触活体组织的生物制剂,不适合采用辐射灭菌,射线有可能改变制剂内活性蛋白结构,造成活性丢失,这类制剂优先选用0.22μm滤膜过滤除菌,同时搭配前期无菌控制流程。

紫外灯照射之后,微生物在适宜环境下存在光修复的可能性,灭菌完成后不要立刻引入强光照射,静置一段时间再投入使用,能够减少微生物修复带来的影响。

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